培养基恒温箱常用保存10种培养基的配置和质控标准

培养基恒温箱常用保存10种培养基的配置和质控标准

小结：常用10种培养基的配置和质控标准

培养基恒温箱恒温箱常用的参数

型号FYL-YS-430L

品牌福意联

产品形式立式

恒温系统制热系统，制冷系统

方式风循环，多孔入风

额定频率50Hz

噪音45dB（a）

功率160W

电压220V

温度范围2-48℃每一度恒温调节

报警功能高温低温报警、温感器故障报警、意外断电报警

外形尺寸595×680×1805mm（宽深高）

内部尺寸510×530×1585mm（宽深高）

容    积430L

温控方式电子控温

温度显示液晶数字显示

重量（KG）105KG

箱脚可调校箱脚

材料配置

外部材料优质钢板，经先进防腐化喷涂工艺

内部材料ABS工程塑料（另有不锈钢系列）

层架7层可调节钢丝浸塑搁架

保温材料高密度聚氨酯整体发泡

门体三层高强度钢化玻璃

风机双优质风机

安全锁有安全锁

（1） 基础肉汤

成分和配制方法：

每次新配制时做质控

阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种基础肉汤中，35℃温箱24h肉汤混浊。

无菌试验：<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的基础肉汤35℃温箱24h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做

用途：供培养对营养要求不高的细菌增菌用；作其他选择培养基的基础液。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存一个月

（2）普通营养琼脂

成分和配制方法：

注：可购买国内生产的瓶装营养琼脂粉，按上面的说明配制。

质量控制：

质控频度  每次新配制时做质控

质控方法

阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌或ATCC25922大肠埃希菌接种营养琼脂上，35℃温箱24h细菌生长良好。

无菌试验：<100块抽检5%,>100块随机抽取10管未接种的营养琼脂35℃温箱24h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做

用途：

供培养对营养要求不高的细菌。

作无糖基础培养基。

加血成血平板。

加血加热75℃以上，再加上生长添加剂就成巧克力平板。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存半个月

（3）葡萄糖肉汤

成分和配制方法：

质量控制：

质控频度  每次新配制时做质控

质控方法

阳性质控：ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种葡萄糖肉汤中，35℃温箱24h肉汤混浊。

无菌试验：<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的葡萄糖肉汤35℃温箱24h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做

用途：供培养对营养要求不高的细菌增菌用。

6 储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存一个月

          （4）血液琼脂平板

成分和配制方法：（法国生物梅里埃成品培养基）

4g琼脂基础+100mL蒸馏水

  高压灭菌（15磅、121℃）20min

  冷却至50℃加入5%-10%无菌羊（兔）血

  倾注于无菌平皿内（φ9mm）每一个平皿分装13~15ml。

质量控制：

质控频度  每次新配制时做质控

质控方法

阳性质控：ATCC 6303肺炎链球菌（或质控菌株）和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂，35℃温箱24h细菌生长良好。ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。

无菌试验：<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做

用途：供分离培养营养要求较高的细菌。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存半个月

注意事项:

制备血平板时，温度必须适宜，琼脂应冷至50℃左右，如温度过高，可使血液变色不易观察溶血，温度过低，琼脂凝固与血液不易混合。

使用的血液以羊血，兔血为好，不宜使用人血，因人血中有抗体、补体不利细菌生长。羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意，但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。

（5）血液琼脂平板（国产）

冷却至50℃加入5%-10%无菌羊（兔）血

  倾注于无菌平皿内（φ9mm）每一个平皿分装13~15ml。

质控方法

阳性质控：ATCC 6303肺炎链球菌（或质控菌株）和ATCC 25923金黄色葡萄球菌接种于血液琼脂，35℃温箱24h细菌生长良好。ATCC 6303肺炎链球菌为α溶血。ATCC 25923金黄色葡萄球菌为β溶血。

无菌试验：<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的血液琼脂35℃温箱24h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做

用途：供分离培养营养要求较高的细菌。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存半个月

注意事项:

制备血平板时，温度必须适宜，琼脂应冷至50℃左右，如温度过高，可使血液变色不易观察溶血，温度过低，琼脂凝固与血液不易混合。

使用的血液以羊血，兔血为好，不宜使用人血，因人血中有抗体、补体不利细菌生长。羊血对链球菌、葡萄球菌的溶血比较满意，但可抑制脑膜炎奈瑟氏菌与嗜血杆菌的生长。

（6）巧克力平板

成分和配制方法：

方法：高压灭菌后，冷至80—85℃加入兔血，混匀置85℃水浴10—15min，使血液由鲜红色变为巧克力色。取出，当冷至50℃时倾注平板，经无菌试验后，保存冰箱中备用。

质控方法

阳性质控：ATCC10211流感嗜血杆菌或ATCC49619淋病奈瑟菌，35℃，5%CO2温箱24-48h,细菌生长良好。

无菌试验：<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的巧克力平板35℃5%CO2温箱24-48h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做

用途：

分离培养脑膜炎奈瑟氏菌，嗜血杆菌。

淋病奈瑟氏菌的分离培养。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存半个月

（7）双糖培养基

制法：10磅20min高压灭菌高，先将葡萄糖倒入无菌试管内1/3处凝固后，再将乳糖加入2/3处，置成斜面。

质量控制：

质控频度  每次新配制时做质控

质控方法

阳性质控：将福氏痢疾杆菌（卫生部临床检验中心质控菌株）接种于双糖培养基中，生长良好，上层为红色/下层为无色。

阴性质控：将ATCC27853接种于双糖培养基中，35℃温箱24-48h培养生长良好，上层下层均为红色。

无菌试验：<100管抽检5%,>100管随机抽取10管未接种的双糖培养基35℃温箱24-48h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做。

用途：用于分离培养肠道致病菌。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存半个月

（8） MH培养基

成分和配制方法：

可使用国产（北京奥博星生物技术有限公司）或法国生物梅里埃成品培养基配制：

3.8g M-H琼脂基础+100mL蒸馏水

  高压灭菌（15磅、121℃）20min

  冷却至50℃倾倒平皿，厚度4mm

质量控制：

质控频度  每次新配制时做质控

质控方法

阳性质控：ATCC25923、ATCC25922接种于MH培养基上，35℃温箱24-48h培养，细菌生长良好。

无菌试验：<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的MH培养基35℃温箱24-48h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做。

用途：用于非苛养菌的KB法药敏试验用。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存半个月

（9） 沙保弱培养基

成分：蛋白胨 10克，琼脂20克，麦芽糖 40克，水1000毫升。 

方法：于1000ml水中加入上述成分，加热煮沸，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，趁热调PH到7.6，定量分装于烧瓶内（每瓶100ml），高压灭菌103.43Pa15min，倾注于无菌平皿内（φ9mm）每一个平皿分装13—15ml。待凝固后，于37℃培养18—24h，如无细菌生长，置冰箱中备用。

质控频度  每次新配制时做质控

质控方法

阳性质控：ATCC90028接种于沙保罗平板上，35℃温箱24-48h培养生长良好。

无菌试验：<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的沙保罗培养基35℃温箱24-48h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做。

用途：真菌的分离培养用。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存半个月

（10）念珠菌显色培养基

成分:由琼脂、蛋白胨、色素、氯霉素等组成

配制方法：准确称取科玛嘉念珠菌显色琼脂粉47.7克，加蒸馏水1000毫升，并在玻璃容器壁上标记液面刻度，边搅拌边加热到完全溶解，不要用蒸锅消毒，冷却到45℃后，用氨水矫正PH至6.3，摇匀，将其倾注入一次性无菌培养皿中制成平板，使平板深度为3mm左右。

质控频度  每次新配制时做质控

质控方法

阳性质控：ATCC90028接种于念珠菌显色培养基上，35℃温箱24-48h培养生长良好，菌落为翠绿色。

无菌试验：<100块抽检5%,>100块随机抽取10块未接种的沙保罗培养基35℃温箱24-48h培养，无细菌生长。

平行试验：质控时，要求新旧批号的培养基同时做。

用途：念珠菌的常规鉴定用。

储存

干粉：室温保存，由于容易受潮，所以开瓶后务必将盖拧紧。

培养基：2-8℃保存半个月

基础质控标准1